3D сканирующий лазерный микроскоп-спектрометр Confotec CARS
Confotec CARS

SOL Instruments

CARS, Рамановский / люминесцентный сканирующий конфокальный микроскоп

Описание Confotec CARS

Confotec CARS – это многофункциональный многоканальный 3D сканирующий лазерный микроскоп-спектрометр. Confotec CARS предназначен для одновременного и многофункционального анализа: построения высококонтрастных изображений с помощью CARS сигнала; конфокальных Рамановских изображений; конфокальных флуоресцентных изображений; конфокальных изображений в отраженном лазерном излучении и т.д.

 

 

Микроскоп Confotec® CARS объединяет в единой системе:

 

  • ARS сканирующий микроскоп
  • Рамановский/люминесцентный сканирующий конфокальный микроскоп
  • Традиционный сканирующий конфокальный лазерный микроскоп

 

 

Справа – Мультимодальное CARS/TPEF изображение растущих клеток рака HeLa: DNA/RNA/Proteins/Lipids цветное представление

Слева – 3D CARS изображение структуры жидкого кристалла 8CB на резонансной частоте 2236 cм-1

 

Преимущества CARS метода:

 

  • Высокая чувствительность: во время CARS процесса генерируются более сильные и направленные сигналы по сравнению с сигналами в спонтанной Рамановской микроскопии.
  • Анти-Стоксовый CARS сигнал имеет частоту, превышающую частоты волн накачки, и детектируется в спектральном диапазоне, свободном от мешающих засветок стоксовой люминесценции.
  • CARS сигнал генерируется только в фокусе, где интенсивность возбуждения является самой высокой. Это позволяет регистрировать изображения с высоким пространственным разрешением без использования конфокальных пинхолов, а также проводить трехмерное 3D сканирование по слоям с минимальным влиянием соседних слоёв на результаты измерений.
  • Спектральное разрешение CARS сигналов определяется только ширинами линий лазеров накачки, что позволяет упростить спектральные измерения, так как регистрация CARS сигналов может производиться без использования спектрального прибора.
  • CARS сигнал пропорционален квадрату концентрации молекул, что позволяет, наряду с селективностью и неинвазивностью метода, использовать CARS метод для количественных измерений концентрации химической субстанции в исследуемом образце.
  • Минимально инвазивная техника для биологических образцов: благодаря высокой чувствительности, с помощью CARS метода молекулы в живых клетках можно регистрировать без флуоресцентных меток.
  • Три вида CARS измерений: F-CARS, Е-CARS и P-CARS

 

 

Ключевые особенности

 

Высокое пространственное разрешение:
CARS XYZ < 0.7 μм
Раман XY < 300 нм
Z < 700 нм
Широкой спектральный диапазон:
CARS 985 – 5000 см-1
Раман 75 – 6000 см-1
Высокое спектральное разрешение:
CARS 7 — 8 см-1
Раман 0.25 см-1

 

 

 

 

Одновременный / многофункциональный анализ:

 

  • Построение высококонтрастных изображений с помощью CARS сигнала (не требуется предварительных добавок в исследуемые образцы).
  • Построение конфокальных Рамановских изображений.
  • Построение конфокальных флуоресцентных изображений, включая двух/мульти-фотонную эмиссию.
  • Построение конфокальных изображений в отраженном лазерном излучении.
  • Построение высококонтрастных изображений в прошедшем лазерном излучении.
  • Визуализация профиля поверхности посредством генерации сигнала второй гармоники.

 

 

Пять независимых скоростных каналов для регистрации до четырёх 2D и 3D изображений одновременно:

 

  • F-CARS: CARS сигнал в попутном (Forward) направлении.
  • E-CARS & Raman: CARS сигнал в обратном (EPI) направлении / Raman сигнал.
  • Reflected: сигнал отражённого лазерного излучения.
  • Transmitted: сигнал прошедшего через образец излучения.
  • Luminescent: люминесцентный сигнал.
  • Поляризационное управление возбуждением и детектированием.
  • Моноблочная лазерная система для возбуждения CARS сигналов.
  • Дополнительный лазер 633 нм для возбуждения стандартной однофотонной флуоресценции и спонтанного Рамановского рассеяния.
  • Полностью автоматизированное управление: переключение режимов измерений путем автоматического переключения необходимых компонентов внутри системы.

 

 

 

Три режима сканирования:

 

  • сканирование лазерного луча по поверхности неподвижного образца с помощью XY сканера;
  • перемещение образца с помощью XY автоматизированного стола относительно неподвижного лазерного луча
  • комбинированный режим для получения панорамных изображений с высокой скоростью и высоким пространственным разрешением: XY сканер + автоматизированный стол

 

 

Высокая точность калибровки по длинам волн: лучше ±0,002нм благодаря использованию встроенной калибровочной лампы в качестве источника реперных линий для автоматической оперативной калибровки монохроматора-спектрографа. Блочная, жесткая, стержневая конструкция обеспечивает высокую временную и температурную стабильность.

 

 

Интуитивно понятное программное обеспечение NanoSP для работы с микроскопом

 

Программный комплекс NanoSP предназначен для получения, обработки и идентификации спектральных данных при работе со сканирующими Рамановскими микроскопами серии Confotec®. NanoSP – это современное программное обеспечение c интуитивно понятным пользовательским интерфейсом, отличающееся простотой в использовании и обеспечивающее:

  • Контроль всех автоматизированных узлов и модулей микроскопов серии Confotec®.
  • Проведение спектральных измерений в выбранном месте образца.
  • Получение одномерных, двухмерных или трехмерных карт образца, используя отраженный лазерный свет или рамановский сигнал.
  • Обработку и анализ полученных экспериментальных данных.

 

 

Применение многофункционального микроскопа-спектрометра Confotec® CARS

 

 

  • Нанобиотехнологии: неинвазивный анализ биологических образцов (клеток и компонент живых клеток) и протекающих в них процессов в реальном времени и с высоким пространственным разрешением.
  • Исследования с применением микро- и нанотехнологий для изучения свойств микро-структур небиологической природы: полупроводники, жидкие кристаллы, полимеры, фармацевтические вещества, микро- и наночастицы.

 

Общие характеристики системы

 

Пространственное XYZ разрешение CARS сигналов
(объектив 60х NA-1.2, водо-иммерсионный):
< 0.7 μм
Пространственное разрешение Рамановских сигналов
(длина волны лазера 633 нм; объектив 60х NA-1.2, водо-иммерсионный):
XY: < 300 нм
Z:   < 700 нм
Спектральный диапазон регистрации: CARS сигналов:            985 – 5000 см-1
Рамановских сигналов: 75 – 6000 см-1
Спектральное разрешение: CARS сигналов:            7-8 см-1
Рамановских сигналов: 0.25 см-1(решетка 75 штр/мм Эшелле);
0.6 см-1 (решетка 1800 штр/мм)
Диапазон скоростного сканирования (с объективом 60х) XY: 225 х 225 μм
Z:   80 μм
Управление: полная автоматизация

 

 

Оптический микроскоп

 

Тип: инвертированный
Модель: Nikon Ti-U
Стол: моторизованный
– диапазон перемещения: 114 х 75 мм
– точность (1мм перемещения): 0.06 μм
– XY воспроизводимость: ± 1 μм
– минимальный шаг перемещения стола: 0.02 μм
Микрообъективы: 60 х NA-1.2 водо-иммерсионный
20 x NA-0.45
Z-сканер:
– тип: пьезосканнер
– диапазон перемещения объектива: 80 μм
– минимальный шаг: 50 нм
– воспроизводимость: < 6 нм
Осветитель для работы в отраженном свете: галогеновая лампа 100 Вт
Осветитель для работы в проходящем свете: светодиодный
Ввод лазерного излучения: трехпозиционная автоматизированная турель
Цифровая видеокамера высокого разрешения:
– тип: цифровая цветная ПЗС-камера
– сенсор: 1/2″, 2048 x 1536 пикселей
– АЦП: 10 бит, скорость 12 кадров/сек

 

 

Лазер для возбуждения CARS сигналов.

 

Моноблочная Оптическая Параметрическая Система в составе:
Пикосекундный твердотельный Nd:YVO4 лазер
Длина волны излучения: 1064 нм
Длительность импульса: 6.5 пс
Выходная мощность: 6 Вт
Частота повторения импульсов: 85 МГц
Модовый состав: TEM00
Качество пучка (М2): < 1.5
Диаметр пучка: 2 мм
Перестраиваемый SOPO
(Synchronously pumped Optical Parametrical Oscillator)
Диапазон длин волн: 690 – 990 нм
Выходная мощность: > 400 мВт (800 нм)
Длительность импульса: 5 – 6 пс
Частота повторения импульсов: 85 МГц
Поляризация: горизонтальная
Модовый состав: TEM00
Качество пучка (М2): < 1.2
Диаметр пучка: 2 мм
Встроенная оптическая линия задержки

 

 

Лазер для Рамановской спектроскопии

 

Тип лазера: CW HeNe
Длина волны излучения: 632.8 нм
Средняя мощность: > 10 мВт
Поляризация: линейная
Диаметр пучка: 0.65 мм
Расходимость пучка: < 1.24 мрад

 

 

Модуль формирования и совмещения лазерных пучков

 

Лазерные затворы: 3 (Nd:YVO4 лазер, SOPO и HeNe лазер)
Поляризатор: 2 (Nd:YVO4 лазер и SOPO)
Фазовая пластинка λ/2 2 (Nd:YVO4 лазер и HeNe лазер)
Вариотелескоп: 3 (Nd:YVO4 лазер, SOPO и HeNe лазер)

 

 

 

Оптический модуль

 

Оптика, оптимизированная для спектрального диапазона: 400 – 1100 нм
Анализатор: призма Глан-Тэйлора
Ослабитель лазерного излучения: нейтральный фильтр переменной плотности 0 – 3D
Позиционер предпинхольного объектива: трехкоординатный (X, Y, Z)
Позиционер CARS, Рамановских и флуоресцентных фильтров: пятипозиционный
Позиционер дихроичных фильтров: шестипозиционный

 

 

Монохроматор-спектрограф изображения MS 5004i

 

Фокусное расстояние: 520 мм
Относительное отверстие (по входу): 9.8
Увеличение горизонтальное: 1.0
Увеличение вертикальное: 1.0
Вертикальное пространственное разрешение: < 20 μм
Размер плоского поля: 28 х 5 мм
Рассеянный свет
(на расстоянии 20 нм от линии лазера 633 нм)
1 х 10-5
Узел дифракционных решеток: автоматизированная турель на 4 решетки
Спектральное разрешение
(длина волны 633 нм, CCD pixel 12×12 μм)
0.01 нм (решётка 75 штр/мм Эшелле)
0.025 нм (решётка 1800 штр/мм)
Спектральная щель входная: автоматизированный конфокальный пинхол,
плавно регулируемый от 0 до 1.5 мм
Спектральная щель выходная: автоматизированная,
плавно регулируемая от 0 до 2 мм
Порты: 1 входной, 2 выходных
Детектор (Раман, E-CARS, скоростные измерения) Hamamatsu Photosensor module H7844
с Пельтье – охлаждением

 

 

Монохроматор для флуоресцентных измерений (интегрирован в MS 5004i)

 

Фокусное расстояние: 100 мм
Входная щель: конфокальный пинхол MS 5004i
Выходная щель: фиксированная, ширина 4.2 мм
Дифракционная решетка: 600 штр/мм
Спектральный диапазон: 400 – 920 нм
Обратная линейная дисперсия: 13 нм / мм
Детектор Hamamatsu Photosensor module H7844
с Пельтье – охлаждением

 

 

Спектральная камера (Раман, E-CARS)

 

Тип: цифровая ПЗС камера
Фотоприемник: back-thinned ПЗС матрица 2048 х 122 пикселей
Размер фоточувствительного элемента: 12 х 12 мкм
Размер фоточувствительного поля: 24.576 х 1.464 мм (длина х высота)
Область спектральной чувствительности: от 200 до 1100 нм
Охлаждение с температурной стабилизацией: двухступенчатое Пельтье-охлаждение до – 45 °С
Разрядность аналого-цифрового преобразователя (АЦП) камеры: 16 бит
Чувствительность: 1 фотон на 1 отсчет АЦП (на длине 650 нм)
Динамический диапазон: не менее 10 000

 

 

Модуль скоростного сканирования X, Y

 

Сканнеры: гальванометрические сканнеры зеркал (X, Y)
Режимы сканирования: растровый скоростной и старт-стопный
Точность позиционирования: < 30 нм
Сканируемая площадь: 225 μм х 225 μм (с объективом 60Х)
Скорость сканирования скоростного режима: 4 сек/кадр 1000 х 1000 точек

 

 

Модуль конфокального лазерного микроскопа (Reflected)

 

Позиционер предпинхольного объектива: трехкоординатный (X, Y, Z)
Конфокальный пинхол: автоматизированный конфокальный пинхол,
плавно регулируемый от 0 до 1.5 мм
Детектор: Hamamatsu Photosensor module H6780-01

 

 

Модуль регистрации F-CARS и прошедшего излучения

 

Анализатор: призма Глан-Тэйлора
Позиционер F-CARS фильтров: четырехпозиционный
Детектор для регистрации F-CARS: Hamamatsu Photosensor module H7844 с Пельтье – охлаждением
Детектор для регистрации прошедшего излучения: Hamamatsu Photosensor module H6780-01

 

 

Модуль управления и обработки сигнала

 

Количество каналов регистрации: 5
Количество одновременно регистрируемых каналов: до 5
Интерфейс связи с компьютером: Ethernet 100 Base-T по протоколу TCP/IP

 

 

Оптический стол

 

Все составные части расположены на оптической плите, установленной на виброгасящих опорах

 

Брошюра Confotec
Загрузить
Каталог Confotec NR500
Загрузить
Каталог Confotec MR серия
Загрузить
Каталог ЭМТИОН
Загрузить

Может быть полезно:

3D микроскоп DMS1000

  3D визуализирующий микроскоп DMS1000 – это цифровой микроскоп […]

Запрос цены Подробнее
Ntegra SPECTRA

  Ntegra Spectra это исследовательская платформа, разработанная для проведения […]

Запрос цены Подробнее

Оставьте заявку

И мы ответим на интересующие Вас вопросы